X-α-Gal是一種酵母半乳糖苷酶 (MEL1) 的顯色底物,用于在培養基上直接檢測GAL4系統的酵母雙雜交作用。通過藍白顏色篩選,快速和簡便地識別陽性的藍色克隆,無需費時的β-半乳糖苷酶報告基因檢測。
X-α-Gal檢測酵母MEL1基因的激活,MEL1是GAL4酵母雙雜交系統的一個報告基因,編碼分泌型的α-半乳糖苷酶。該酶可水解無色的X-α-Gal底物并zui終產生藍色產物。表達α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培養基上顯藍色,即陽性的雙雜交作用。
用 途:
(1)α-半乳糖苷酶的顯色底物,形成藍色沉淀。在培養基上直接檢測酵母雙雜交相互作用,利用此底物可以省去雙雜交體系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays;
(2)用于區分腸桿菌科內的不同菌種以及區分雙歧桿菌和乳酸菌;
(3)在組織化學中用于酶活性的檢測;
儲存液的配制及使用步驟:
A)涂布于預制平板:溶解24mg X-α-gal于6 mL DMF,終濃度為4mg/ mL的溶液。
①涂布200ul(15cm) 或者100ul(10cm)X-α-gal 儲存液于預制平板上;
②放于37℃培養箱至液體被吸收(由于DMF揮發性低,zui長可放4小時);
③將轉化細菌或酵母涂于平板上,于37℃或30℃培養直至藍色菌落出現。
B)直接加入瓊脂中:溶解60mg X-α-gal于3 mL DMF,終濃度為20mg/ mL的溶液。
①將已滅菌瓊脂培養基冷卻至50-55 ℃;
②往已冷卻的培養基中直接加入2 ml -10 ml 20 mg/ ml X-α-Gal儲存液,混勻,快速倒平板。
外 觀:白色或灰白色結晶粉末,或者無色結晶;
溶 解 度(1%甲醇溶液):無色,清澈;
儲 存: -15°C避光避潮保存;
熱門搜索:Thermo Fisher防脫載玻片,蓋玻片,細胞爬片,生物危害垃圾袋,玻璃試管,比色皿,帶證書溫度計,帶證書計數器,組織勻漿器,細胞篩網